Prevalence, distribution and antifungal susceptibility profiles of Candida parapsilosis, Candida orthopsilosis and Candida metapsilosis bloodstream isolates.

The Candida parapsilosis group encompasses three species: C. parapsilosis, Candida orthopsilosis and Candida metapsilosis. These species are phenotypically indistinguishable, and molecular methods are needed for their detection. We analysed 152 unique blood culture isolates of the C. parapsilosis group obtained during 1997-2011. The isolates were screened by PCR amplification of the gene encoding secondary alcohol dehydrogenase, followed by digestion with the restriction enzyme BanI. Isolates with RFLP patterns distinct from those of the C. parapsilosis group were characterized as C. parapsilosis sensu stricto (90.8 %), C. orthopsilosis (8.6 %) and C. metapsilosis (0.6 %). Antifungal susceptibility tests indicated that all isolates were susceptible to itraconazole, amphotericin B and caspofungin. Although C. orthopsilosis and C. metapsilosis isolates were susceptible to fluconazole, higher MICs (≥2 mg l(-1)) were observed for C. orthopsilosis. Three isolates (2.0 %) of C. parapsilosis sensu stricto were resistant to voriconazole. Five C. parapsilosis isolates (3.3 %) were intermediate, and a single isolate (0.7 %) was resistant (MIC 16 mg l(-1)) to fluconazole. These data were confirmed using reference strains. It was observed that C. parapsilosis isolates were less susceptible to all triazoles, and this finding deserves further attention to assess the appearance of cross-resistance phenomena. In conclusion, C. metapsilosis and C. orthopsilosis are involved in a small but significant number of invasive infections in Brazil.

Caracterização fenotípica e genotípica de isolados clínicos e ambientais de Cryptococcus gattii do Estado de São Paulo / Characterization phenotypic and genotypic isolates clinical and environmental of Criptococcus gattii from São Paulo State

Cryptococcus gattii engloba quatro tipos moleculares que podem causar criptococose em indivíduos, aparentemente saudáveis após inalação de partículas infectantes dispersas no meio ambiente. Resistência clínica a antifúngicos durante o tratamento, ou profilaxia, para a doença tem sido relatada. O manejo adequado desta infecção depende de vários fatores, incluindo o perfil de suscetibilidade antifúngica do agente etiológico. Porém, há poucos relatos disponíveis na literatura sobre a ação in vitro de fluconazol (FLU) e anfotericina B (AMB), fármacos de primeira escolha para casos de criptococose sobre isolados clínicos de C. gattii. Em relação à cepas ambientais, a mesma lacuna é observada, sendo que o monitoramento desses organismos é a base para se estabelecer pontos de corte epidemiológicos para definição de resistência a antifúngicos. A determinação da suscetibilidade é realizada por métodos de referência em provas de microdiluição. No entanto, esses métodos não tem bom desempenho para detectar resistência à AMB, e por isso, a metodologia de curvas de morte foi proposta para avaliar melhor a atividade in vitro desse fármaco. O objetivo deste estudo foi determinar a susceptibilidade a AMB e FLU de 55 amostras de C. gattii, sendo 90.9% clínicas e 9,1% ambientais, isoladas no Estado de São Paulo. Foi utilizada a técnica de PCR-RFLP para identificação dos tipos moleculares e o método de referência europeu (AFST-EUCAST) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Estudos de curvas de morte foram realizados com 1 mg de AMB por L de meio de cultura (RPMI 1640). A maioria dos tipos moleculares, tanto clínicos quanto ambientais, foi VGII (94% e 60%, respectivamente), sendo os demais VGI. As CIMs de FLU variaram de 1 a 64 mg/L e os valores de CIM50 e CIM90, e a concentração necessária para inibir 50% e 90% dos isolados, foram respectivamente de 8 e 16mg/L. Observou-se CIM elevadas (>8mg/L) para 74% dos...